Institutional creator:

Instytut Biologii Doświadczalnej im. Marcelego Nenckiego PAN

Contributor:

Bandorowicz-Pikuła, Joanna (1965- ) : Promotor

Publisher:

Instytut Biologii Doświadczalnej im. Marcelego Nenckiego PAN

Place of publishing:

Warszawa

Description:

[1], 132 strony : ilustracje ; 30 cm ; Bibliografia ; Streszczenie w języku angielskim

Degree name:

doktor nauk biologicznych

Degree discipline :

nauki biologiczne

Degree grantor:

Instytut Biologii Doświadczalnej im. Marcelego Nenckiego PAN ; nadanie stopnia: 2024

Type of object:

Praca dyplomowa

Abstract:

Dysfunkcja śródbłonka jest jednym z początkowych etapów zaburzeń w działaniu układu sercowo-naczyniowego obserwowanym u osób otyłych. Zwiększone stężenie kwasów tłuszczowych towarzyszące otyłości, w tym kwasu palmitynowego (PA) występującego w największej ilości, może przyczyniać się do rozwoju zaburzeń śródbłonkowych. Czynnik von Willebranda (vWF) wytwarzany i wydzielany głównie przez komórki śródbłonka, pełni ważną rolę w regulacji krzepnięcia. Wzrost stężenia vWF w osoczu osób chorych na otyłość może przyczyniać się do zwiększenia ryzyka rozwoju chorób sercowo-naczyniowych. Celem niniejszej rozprawy doktorskiej było zbadanie wpływu PA na wydzielanie vWF przez komórki HUVEC. Doświadczenia prowadzono w łagodnych warunkach stresu wywołanego obecnością kwasu tłuszczowego, to znaczy takich, które były wystarczające do spowodowania wzrostu ilości białek adhezyjnych ICAM-1 i VCAM-1, co jest znacznikiem odpowiedzi prozapalnej śródbłonka, ale nie obniżających przeżywalności komórek. Komórki inkubowano w obecności PA o stężeniu nieprzekraczającym 200 μM nie dłużej niż 48 h. Takie podejście umożliwia badanie zmian adaptacyjnych odpowiedzi na bodziec. Wykazano, że w łagodnych warunkach, wydzielanie vWF jest zwiększone po inkubacji w obecności PA, co jest skutkiem zwiększonej ekspresji genu VWF oraz stymulacji dojrzewania tego białka. Podjęto próby identyfikacji mechanizmów regulacyjnego wpływu PA na dojrzewanie i wydzielanie vWF, ale nie uzyskano rozstrzygających wyników. Potwierdzono, że PA aktywuje czynnik transkrypcyjny NF-κB, biorący udział w regulacji odpowiedzi zapalnej. Ponadto wykazano, że PA wpływa na zawartość białek receptorowych TLR2, TLR4, TLR6. W celu identyfikacji szlaku sygnałowego aktywowanego przez PA stosowano inhibitory NF-κB oraz TLR2 i TLR4, czyli odpowiednio kardamoninę, C29 i TAK-242. Wykazano, że zwiększona w obecności PA ekspresja genu VWF wynika z aktywacji NF- κB. Ponadto potwierdzono udział receptora TLR4 w aktywowanej przez PA odpowiedzi komórek śródbłonka. W obecności inhibitora TLR4 i PA, który jest jego ligandem, wykazano zwiększenie ekspresji genów CD36, TIRAP, TLR6, kodujących białka uczestniczące w przekazywaniu sygnału pochodzącego od receptorów TLR. W obecności inhibitora TLR2 obserwowano zwiększenie aktywności TLR4. Co więcej, wyciszenie ekspresji genu TLR2 spowodowało zwiększenie ilości białka TLR4. Z kolei wyciszenie ekspresji genu TLR4 spowodowało zwiększenie ilości białka TLR2, co zaobserwowano nawet wtedy, gdy na skutek wyciszania obniżeniu ulegał jedynie poziom transkryptu TLR4. Podsumowując, wykazano, że PA reguluje w komórkach śródbłonka wydzielanie vWF poprzez zwiększoną ekspresję genu VWF oraz nasilone dojrzewanie tego białka. Zidentyfikowano udział receptora TLR4 oraz NF-κB w odpowiedzi komórek na PA. Ponadto wykazano, że pomiędzy receptorami TLR2 i TLR4 występuje efekt kompensacyjny, obserwowany na poziomie zarówno aktywności receptorów, jak i mRNA oraz białka. Uzyskane wyniki sugerują, że już stosunkowo niewielki wzrost stężenia kwasów tłuszczowych do poziomu, który aktywuje odpowiedź prozapalną, może być wystarczający do zwiększenia stężenia vWF pozakomórkowego, co potencjalnie powoduje zaburzenia krzepliwości krwi. Udział PA w regulacji wydzielania vWF częściowo tłumaczy zwiększenie stężenia vWF obserwowane w osoczu osób otyłych.

Detailed Resource Type:

Praca doktorska

Resource Identifier:

oai:rcin.org.pl:242441

Source:

IBD PAN, sygn. 20521 ; click here to follow the link

Language:

pol

Language of abstract:

eng

Rights:

Prawa zastrzeżone - dostęp ograniczony

Terms of use:

Zasób chroniony prawem autorskim. Korzystanie dozwolone w zakresie określonym przez przepisy o dozwolonym użytku.

Copyright holder:

Zgoda na udostępnienie pracy w formie cyfrowej wyrażona oświadczeniem autora

Digitizing institution:

Instytut Biologii Doświadczalnej im. Marcelego Nenckiego Polskiej Akademii Nauk

Original in:

Biblioteka Instytutu Biologii Doświadczalnej im. Marcelego Nenckiego PAN

Access:

Zamknięty