Metadata language
Zanaczenie mikroRNA w uszkodzeniu bariery krew-mózg w encefalopatii wątrobowej
Creator: Institutional creator:Instytut Medycyny Doświadczalnej i Klinicznej im. Mirosława Mossakowskiego PAN
Contributor:Zielińska, Magdalena (Promotor)
Place of publishing: Date issued/created: Description:Cykl 4 publikacji; 173 s.: il., wykr., tabl.; 30 cm. ; Bibliografia zawiera 112 pozycji.
Degree name: Level of degree: Degree discipline : Degree grantor:Instytut Medycyny Doświadczalnej i Klinicznej im. M. Mossakowskiego PAN
Type of object: Subject and Keywords:Encefalopatia wątrobowa ; Bariera krew-mózg ; mikroRNA
Abstract:
Encefalopatia wątrobowa (ang. hepatic encephalopathy; HE) ujawniająca się w wyniku uszkodzeń wątroby stanowi istotny problem epidemiologiczno - ekonomiczny, który dotyczy ~1 miliona mieszkańców krajów UE. Najpoważniejszym objawem klinicznym jest obrzęk mózgu prowadzący w większości przypadków ostrej i w stanach zaostrzenia przewlekłej HE, do zgonu pacjenta. Mechanizm obrzęku mózgu w HE jest głównie następstwem obrzmienia astrocytów, jednak udział czynnika naczyniowego, związanego z dysfunkcją bariery krew mózg (ang. blood - brain barrier; BBB) wydaje się mieć również istotne znaczenie. Biorąc pod uwagę liczbę współgrających elementów, wiedza dotycząca uszkodzenia i deregulacji składowych BBB wymaga uszczegółowienia. W przebiegu procesów patologicznych coraz częściej zwraca się uwagę na udział jednoniciowych, niekodujących RNA - mikroRNA (ang. microRNA; miRNA), postawiono więc hipotezę zakładającą, że jedną z przyczyn uszkodzenia BBB w HE są zmiany profilu miRNA. Celem dysertacji była analiza profilu miRNA w osoczu i korze mózgowej szczurów z hiperamonemią prostą i szczurów z ostrym uszkodzeniem wątroby oraz wykazanie molekularnego podłoża zmian w komórkach śródbłonka naczyniowego mózgu, głównego elementu tworzącego BBB. Doświadczenia wykonano wykorzystując (1) modele in vivo tj. szczurzy model hiperamonemii i szczurzy model ostrego uszkodzenia wątroby (2) modele in vitro tj. linię komórek śródbłonka naczyń mózgu szczura (ang. rat brain endothelial cell line; RBE4) i pierwotne hodowle komórek śródbłonka naczyń mózgu szczura (ang. primary brain microvascular endothelial cells; PBMEC), oraz (3) izolowane naczynia mózgu szczura. Na podstawie analizy profilu miRNA osocza i kory mózgowej szczurów modelowych, zidentyfikowano odpowiednio w modelu hiperamonemii prostej 35 i 338, a w modelu ostrego uszkodzenia wątroby 128 i 345 zmienionych miRNA, zaś analiza bioinformatyczna, wykorzystująca dostępne narzędzia oraz bazy danych wykazała potencjalny związek 2 miRNA z genami kodującymi białka związane strukturalnie i funkcjonalnie z BBB (okludynę, integrynę 1β). W ocenie morfologicznej BBB wykazano uszkodzenia obejmujące zmiany morfologii komórek śródbłonka, korelujące ze zwiększoną przepuszczalnością BBB. W badaniach in vitro, w komórkach śródbłonka naczyń mózgowych, analizowano zmiany poziomu ekspresji badanych białek, ze wskazaniem ich znaczenia funkcjonalnego, wykazując udział zidentyfikowanych miRNA-122-5p i miRNA-183-5p w obniżeniu poziomu ekspresji odpowiednio: okludyny i integryny 1β. Oceniona w modelu OA zmniejszona gęstość naczyń mózgowych sugerowała zmienione unaczynienie mózgu, porównywalne z unaczynieniem mózgu szczurów 12 miesięcznych, sugerując zmiany charakteryzujące starzenie normatywne. Zmieniony fenotyp komórek śródbłonka zweryfikowano w badaniach in vitro, wykazując cechy charakterystyczne dla procesu starzenia. 9 Skonstruowano, wykonano i przetestowano autorski system do pomiaru wartości rezystancji elektrycznej, służący ocenie integralności komórkowych modeli BBB w czasie rzeczywistym. Wartości pomiarów uzyskane w testach komórkowych były niezależne od zmian pH i temperatury, cechowały się wyższą dokładnością i precyzją, dlatego urządzenie wydaje się być odpowiednim narzędziem do badań toksyczności związków / leków w ocenie funkcji barier biologicznych. Podsumowując, wyniki dysertacji poszerzają wiedzę na temat patomechanizmu uszkodzeń BBB w HE, w szczególności komórek śródbłonka. W kontekście dysfunkcji wątroby, badania wskazują na znaczenie miRNA w komunikacji na osi wątroba-mózg. Wyniki badań dostarczają nowych danych na temat roli miRNA w regulacji funkcji BBB, co może mieć potencjalne zastosowanie w diagnostyce i terapii zaburzeń neurologicznych związanych z chorobami wątroby. Konstrukcja autorskiego systemu do pomiaru rezystancji warstwy komórek, stanowi wartość interdyscyplinarną dysertacji.
IMDiK PAN, sygn. ZS 439 ; click here to follow the link
Language: Language of abstract: Rights:Licencja Creative Commons Uznanie autorstwa 4.0
Terms of use:Zasób chroniony prawem autorskim. [CC BY 4.0 Międzynarodowe] Korzystanie dozwolone zgodnie z licencją Creative Commons Uznanie autorstwa 4.0, której pełne postanowienia dostępne są pod adresem: ; -
Digitizing institution:Instytut Medycyny Doświadczalnej i Klinicznej im. M. Mossakowskiego Polskiej Akademii Nauk
Original in:Biblioteka Instytutu Medycyny Doświadczalnej i Klinicznej im. M. Mossakowskiego PAN
Access: